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技術文章

PCR儀使用時主要考慮的因素有哪些?

那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡單介紹一下關于PCR儀的一些主要需要考慮的因素做簡單的說明:
 
1、樣本管的種類:
     現在主要有0.2ml和0.5ml兩種,使用0.5ml PCR管的人員已經很少了,一是0.5ml PCR專用的薄壁管很少見,二是如果想要較大體積的PCR產物,可以通過多分幾個0.2ml PCR管來實現。 除非經常需要較大體積的PCR產物,否則可以不必考慮0.5ml型的PCR儀  
2、樣本容量:
     種類很多,0.2ml的有96孔和48孔,0.5ml的有60孔和30孔,384孔等,當然還有一些其他組合:如0.2ml的48孔與0.5ml的30孔組合。
3、溫度梯度功能:
     即不同列或不同行之間溫度可以為不同的溫度。這一功能對于固定PCR程序的檢驗人員來講,可能用處不大,但對于經常進行不同基因擴增的研究人員來講可以說是必須的。
4、計算控溫與模塊控溫:
  模塊控溫是早期PCR儀所使用的控溫方式,即所設定的溫度為加熱模塊的溫度,在變溫過程中,快要達到目標溫度時,PCR儀將升降溫速率降低,讓模塊的溫度慢慢接近目的溫度,而不發生過沖。計算控溫也稱為管式控溫,即考慮的是PCR反應管中的溫度,為了加快使反應管中溫度達到目的溫度,模塊溫度先過沖,然后在反應管中溫度接近達到目的溫度時調節到合適的溫度,調節方式是通過理論計算與實驗相結合而來的,與反應管中的反應液的體積有關,因此計算控溫模式都需要實驗人員輸入反應液的體積。計算控溫模式已經是普遍采用的方式了。
5、斷電保護功能:
  這也是一個很有用的功能,特別是在中小城市,經常會發生短時間停電、保險絲融斷以及空氣開關跳閘等現象,如果沒有這一功能,開機后不能自動接下來進行實驗,往往會影響工作
6、熱蓋功能:
   熱蓋功能是各個廠家都有的,如果沒有,怕是沒人要了。熱蓋也分為可調式熱蓋和不可調式熱蓋。可調式熱蓋中又有力矩式可調熱蓋,主要解決在壓緊熱蓋時用力過大及過小的問題。
7、軟件功能:
   儀器軟件功能方面當然都可以設置PCR程序了,只是方便不方便的問題,用熟了便方便了,差別都不大。只是有的顯示屏大些,可以畫出一個溫度變化曲線來,但大都是模擬的,意義也不大,只是好看些。還有如每個循環增減溫度以及增減時間的功能,好像多數儀器都有,如有這方面的需要則要注意一下。
8、使用壽命:
   儀器的使用壽命,如果不考慮維修的成本,則主要與半導體制冷片的壽命相關。
9、電源可靠性:
   這是一個很重要的因素,但也是用戶有所忽視一個因素。因為絕大多數的儀器出現故障都是由于電源問題或是電源問題造成的。由于PCR儀是一個變溫儀器,也是一個使用時間長并且經常連續使用的儀器,有些用戶一天使用達20小時左右。電源出問題的原因是多方面的,一是潮氣和灰塵,在國內,北方的灰塵很大,南方的潮氣很重。有時灰塵大到有些PCR儀打開后看不到電子元件了,電路板散熱不好,造成電源部分燒壞。有時潮氣大到儀器內可以流出水來,造成電路板短路,電源部分燒壞。
10、維修成本與保修時間:
  這是一個很實際的問題,大多數PCR儀都只保修一年,有些在用戶的要求下會增加保修時間。一般儀器的保修費用為儀器價格的8-12%每年,所以保修也就是錢。一般來講進口儀器的維修成本會比較高,一是配件成本本身就高,二是運輸費用及進口關稅等。另外進口儀器廠家一般都不允許進行原件級的維修,是出于利潤以及質量兩方面的考慮,其實國外元件級維修的成本也許比更換電路板成本還高。因此只有國內人員才進行元件級的維修,國內人力成本低,水平也高些。
11、溫度的準確性與jingque性:
準確性與jingque性都是有標準定義的。jingque性也稱jingque度(precision),指調查或試驗中同一指標或性狀的重復觀測值彼此接近程度的大小。就PCR儀來講,準確性指的是設定溫度與實際溫度差別的大小,而jingque性則是指不同孔間溫度的差別。一般來講,加熱模塊的中心溫度的準確性和jingque性都要好些。
12、升降溫速率:
這是很多的購買者關心的問題,它可能會影響PCR反應時間。但在這個問題上有些理解上的差別。一般儀器所標注都是大升降溫速率,而用戶所理解的是溫度差與升降溫所用時間比值。這是有些用戶發現升降溫速率達不到儀器所標注的速率的原因。用戶所關心的是對用戶來講有意義的。過度的升降溫速率對于用戶來講意義不大,因為容易引發溫度過沖,并需要較長時間來調整。
13 、其他:
如噪音大小、外觀等也是需要考慮的。噪音就不必講了,當然是越小越好。外觀上各有所好,也不好評說,但在國內還需要考慮的有是否顯臟。
 
以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結關于PCR儀的一些主要需要考慮的因素做簡單的說明。
 
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