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分子篩(凝膠過濾層析)蛋白純化系統的應用領域

分子篩(凝膠過濾層析)蛋白純化系統的應用領域
分子篩層析也并非一無是處,其應用領域主要包括以下方面:
1)脫鹽:
高分子(如蛋白質、核酸、多糖等)溶液中的低分子量雜質,可以用分子篩層析除去,這一操作稱為脫鹽。本法脫鹽操作簡便、快速,蛋白質和酶類等在脫鹽過程中不易失活,樣品體積可達柱床體積的25%-30%,為了防止蛋白質脫鹽后溶解度降低會形成沉淀吸附于柱上,一般用醋酸銨等揮發性鹽類緩沖液使層析柱平衡,然后加入樣品,再用同樣緩沖液洗脫,收集的洗脫液用冷凍干燥法除去揮發性鹽類。
2)分離提純:
分子篩層析已廣泛用于酶、蛋白質、氨基酸、多糖、激素、生物堿等物質的分離提純。
3)測定高分子物質的分子量:
用一系列已知分子量的標準品放入同一凝膠柱內,在同一條件下層析,記錄每一分鐘成分的洗脫體積,并以洗脫體積對分子量的對數作圖,在一定分子量范圍內可得一直線,即分子量的標準曲線。測定未知物質的分子量時,可將此樣品加在測定了標準曲線的凝膠柱內洗脫后,根據物質的洗脫體積,在標準曲線上查出它的分子量。
4)高分子溶液的濃縮:
通常將Sephadex G-25或50干膠投入到稀的高分子溶液中,這時水分和低分子量的物質就會進入凝膠粒子內部的孔隙中,而高分子物質則排阻在凝膠顆粒之外,再經離心或過濾,將溶脹的凝膠分離出去,就得到了濃縮的高分子溶液。

以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結關于嘉鵬蛋白純化系統的應用領域。
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