- 所在位置: 首頁
- 技術文章
- 薄層色譜法(三)操作
薄層色譜法(三)操作
那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡單介紹一下關于薄層色譜法(三)操作:
薄層板除另有規定外,將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合,去除表面的氣泡后,倒入涂布器中,在玻板上平穩地移動涂布器進行涂布(厚度為0.2~0.3mm),取下涂好薄層的玻板,置水平臺上于室溫下晾干,后在110℃烘30分鐘,即置有干燥劑的干燥箱中備用。使用前檢查其均勻度(可通過透射光和反射光檢視)。
手工制板一般分不含粘合劑的軟板和含粘合劑的硬板倆種。
常用吸附劑的基本情況:顆粒的大小,太大洗脫劑流速快分離效果不好,太細溶液流速太慢。一般說來吸附性強的顆粒稍大,吸附性弱的顆粒稍小。氧化鋁一般在100-150目。氧化鋁分為堿性氧化鋁,適用于碳氫化合物、生物堿及堿性化合物的分離,一般適用于PH為9-10的環境。中性氧化鋁適用于醛、酮、醌、酯等PH約為7.5的中性物質的分離。酸性氧化鋁適用于PH4~4.5的酸性有機酸類的分離。氧化鋁、硅膠根據活性分為五個級,上等活性*高,五級*低。
黏合劑及添加劑:為了使固定相(吸附劑)牢固地附著在載板上以增加薄層的機械強度,有利于操作,需要時在吸附劑中加入合適的黏合劑:有時為了特殊的分離或檢出需要,要在固定相中加入某些添加劑。
薄層板的活化:硅膠板于105-110℃烘30分鐘,氧化鋁板于150-160℃烘4小時,可得活性的薄層板。
點樣除另有規定外,用點樣器點樣于薄層板上,一般為圓點,點樣基線距底邊2.0cm,樣點直徑及點間距離同紙色譜法,點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。
點樣直徑不超過5mm,點樣距離一般為1~1.5cm即可。
樣品在溶劑中的溶解度很大,原點將呈空心環--環形色譜效應。因此配制樣品溶液時應選擇對組分溶解度相對較小的溶劑。
點樣方式有點狀點樣和帶狀點樣。
以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結關于薄層色譜法(三)操作。
我們上海金鵬分析儀器有限公司是專業生產超蛋白純化系統、超微量核酸蛋白測定儀、
化學發光成像系統、凝膠成像分析系統、紫外分析儀、核酸蛋白檢測儀、紫外檢測儀、
光化學反應儀、旋渦混合器、恒流泵、自動部分收集器等為核心的十幾個產品系列的廠家,歡迎大家前來訂購