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液相色譜的保養(yǎng)知識
1、 色譜柱長時間不用,存放時,柱內(nèi)應充滿溶劑,兩端封死(如ACN適于反相色譜柱,正相色譜柱用相應的有機相)
2、 對于手動進樣器,當使用緩沖溶液時,要用水沖洗進樣口,同時搬動進樣閥數(shù)次,每次數(shù)毫升。
3、流動相使用前必須過濾,不要使用多日存放的蒸餾水(易長菌)。
4、帶seal-wash的1100,要配制90%水+10%異丙醇,以每分2—3滴的速度虹吸排出,溶劑不能干涸。
5、其它主意事項見說明書,或由現(xiàn)場工程師介紹。維護保養(yǎng)知識問答
1、 為什么溶劑和樣品要過濾?
溶劑和樣品過濾非常重要,它會對色譜柱、儀器起到保護作用,消除由于污染對分析結(jié)果的影響。
色譜柱:由于填料顆粒很細,色譜柱內(nèi)腔很小,溶劑和樣品中的細小顆粒會使色譜柱和毛細管容易堵塞。
儀器:溶劑和樣品中的細小顆粒會增加進樣閥的堵塞和磨損,同時也會增加泵頭內(nèi)的藍寶石活塞桿和活塞的磨損。樣品過濾頭的類型:
30mm內(nèi)徑:適用于大進樣量的過濾,由0.2µm和0.45µm兩種規(guī)格,材料有纖維素,醋酸纖維,聚四氟乙烯。處理樣品體積少于50µl。
13mm內(nèi)徑:適用于范圍廣的過濾,由0.2µm和0.45µm兩種規(guī)格,材料為纖維素。
3mm內(nèi)徑:適用于小進樣量的過濾,由0.2µm和0.45µm兩種規(guī)格。處理樣品體積為7µl。
濾膜類型:
1.聚四氟乙烯濾膜:適用于所有溶劑,酸和鹽,并無任何可溶物。
2.醋酸纖維濾膜:不適用于有機溶劑,特別適用于水基溶液,推薦用于蛋白質(zhì)和其相關(guān)樣品。
3.尼龍66濾膜:適用于大多數(shù)有機溶劑和水溶液,可用于強酸,70%乙醇、氯甲烷、不適用于甲基甲酰胺
4.再生纖維素濾膜:具有蛋白吸收低,同樣適用水溶性樣品和有機溶劑。
2、 為什么HPLC用緩沖鹽時要加在線Seal-wash選項?
HPLC用緩沖鹽時,由于泵頭內(nèi)的緩沖鹽溶液存在壓析鹽現(xiàn)象,析出的細小鹽粒非常堅硬,它附著在藍寶石活塞桿上,隨著藍寶石活塞桿的往復運動,容易產(chǎn)生劃痕,并磨損密封墊,造成漏液等故障現(xiàn)象。在線Seal-wash選項能有效的帶走可能存在的緩沖鹽結(jié)晶。緩沖鹽的濃度在0。1mol或大于0。1mol時,必須使用該在線沖洗選項。